實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心時(shí)間對(duì)分離效果的影響
對(duì)于離心機(jī)的分離效果,我們常常會(huì)考慮離心機(jī)種類(lèi),離心方法,離心介質(zhì)等因素,但是在實(shí)際操作中,除了以上幾點(diǎn),離心機(jī)轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間以及離心介質(zhì)的PH值和溫度等條件也是很重要的,下面就為大家詳細(xì)介紹一下后面三種因素對(duì)于分離效果的影響。
1、離心時(shí)間
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的離心時(shí)間是影響離心效果十分重要的一個(gè)因素,離心方法的不同所需要的離心時(shí)間也會(huì)不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細(xì)介紹。對(duì)于差速離心來(lái)說(shuō),離心時(shí)間指的是某種顆粒*沉降到離心管底的時(shí)間;而對(duì)于等密度梯度離心來(lái)說(shuō),離心時(shí)間則是指顆粒*到達(dá)等密度點(diǎn)的平衡時(shí)間;zui后一個(gè)密度梯度離心的離心時(shí)間指的是形成界限分明的區(qū)帶的時(shí)間。對(duì)于后面兩種離心方法,其所需的區(qū)帶形成時(shí)間或平衡時(shí)間,影響因素很復(fù)雜,可通過(guò)試驗(yàn)后確定。
2、離心轉(zhuǎn)速
離心機(jī)的轉(zhuǎn)速的大小主要由轉(zhuǎn)子的轉(zhuǎn)速和顆粒的旋轉(zhuǎn)半徑來(lái)決定,在說(shuō)明離心條件時(shí),往往也用相對(duì)離心力場(chǎng)來(lái)表示。實(shí)際工作中,離心力場(chǎng)的數(shù)據(jù)是指其平均值。即是指在離心溶液中點(diǎn)處顆粒所受的離心力場(chǎng)。
3、離心介質(zhì)的PH值和溫度
離心介質(zhì)的PH值的設(shè)定一般是處于酶穩(wěn)定的PH范圍內(nèi),可采用緩沖液,在試驗(yàn)過(guò)稱(chēng)重,要避免過(guò)酸或者過(guò)堿的環(huán)境對(duì)離心機(jī)本身產(chǎn)生腐蝕作用。
在實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)工作時(shí),除了要格外注意對(duì)離心介質(zhì)的選擇之外,還要控制好溫度及介質(zhì)溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質(zhì)的凝集、變性和失活。一般來(lái)說(shuō),我們將離心溫度會(huì)控制在4℃左右,對(duì)于某些熱穩(wěn)定性較好的酶等,離心也可在室溫下進(jìn)行。