有關(guān)細(xì)胞離心,我們對(duì)遇到的常見(jiàn)問(wèn)題做一個(gè)總結(jié):
1、細(xì)胞離心的轉(zhuǎn)速和時(shí)間。
2、細(xì)胞離心轉(zhuǎn)速太高會(huì)不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞死亡。
3、細(xì)胞離心多少g.
4、細(xì)胞離心目的和原理。
5、哪些實(shí)驗(yàn)需要做細(xì)胞離心。
辛辛苦苦培養(yǎng)的細(xì)胞,如果因?yàn)殡x心轉(zhuǎn)速太高,出現(xiàn)細(xì)胞死亡,這種重新再來(lái)的心情小編深有體會(huì),為了更好的做好實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)細(xì)胞分離的這一課,我們請(qǐng)來(lái)專(zhuān)家進(jìn)行一一講解。
細(xì)胞離心機(jī)
因?yàn)檗D(zhuǎn)速(RPM)不等同于相對(duì)離心力,同樣的轉(zhuǎn)速得到的離心效果并不盡相同,根本的解決方法還是使用相同的相對(duì)離心力(RCF)。
1.保證細(xì)胞轉(zhuǎn)移的*性
低速離心可以防止細(xì)胞液積存在管蓋和管壁,保證細(xì)胞轉(zhuǎn)移的*性。
2.便于控制細(xì)胞濃度
對(duì)于細(xì)胞濃度要求高的實(shí)驗(yàn),比如需要根據(jù)細(xì)胞數(shù)計(jì)算染料濃度的實(shí)驗(yàn),根據(jù)細(xì)胞數(shù)計(jì)算接種細(xì)胞量的傳代實(shí)驗(yàn),單細(xì)胞測(cè)序相關(guān)實(shí)驗(yàn)等,在細(xì)胞計(jì)數(shù)、離心收集后再根據(jù)細(xì)胞數(shù)量確定重懸體積,更利于控制細(xì)胞濃度
◎ 原代細(xì)胞分離
◎ 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
◎ 免疫細(xì)胞分離
◎ 檢測(cè)前細(xì)胞樣品處理
◎ 溫度敏感型細(xì)胞需要溫控精準(zhǔn),減少細(xì)胞溫度應(yīng)激
◎ 細(xì)胞洗滌離心時(shí),應(yīng)盡量棄去上清,避免培養(yǎng)液/PBS 殘留,影響后續(xù)染色等操作
◎ 升降速過(guò)程可能造成細(xì)胞的機(jī)械損傷,離心時(shí)應(yīng)控制升/降速率
◎ 細(xì)胞制品在收集過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格控制可能產(chǎn)生的污染
◎ 應(yīng)將離心過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)化,利于提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性
轉(zhuǎn)子啟動(dòng)運(yùn)行后,升降速過(guò)程可能造成細(xì)胞的機(jī)械損傷; 活細(xì)胞的離心速度一定要低,優(yōu)選水平離心,收集更充分。
不同類(lèi)型細(xì)胞離心,它們適合的條件也不同。
傳代細(xì)胞離心收集:
離心條件:80g-300 x g,常溫或者 37°C,時(shí)間 3-5 min
檢測(cè)用細(xì)胞離心:
離心條件:100g-300 x g,常溫或者 4°C,時(shí)間 3-10 min
特殊細(xì)胞離心收集:
PBMC 分離條件,400 x g,4°C,20 min
◎ 升降速度可控,有利于細(xì)胞梯度離心,減少機(jī)械損傷,同時(shí)防止細(xì)胞重懸,保證細(xì)胞活率和回收率。
◎ 多種水平轉(zhuǎn)子可選,適配各種離心耗材,充分滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)需求。
◎ 溫度控制精確,離心過(guò)程的溫度可實(shí)現(xiàn) 32°/35°/37° 等所需溫度,減少溫度變化對(duì)細(xì)胞的傷害。
◎ “At set RPM" 定速計(jì)時(shí)功能,可在達(dá)到預(yù)設(shè)轉(zhuǎn)速時(shí)才開(kāi)始計(jì)時(shí),去除了升至設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí)耗費(fèi)的時(shí)間,確保離心時(shí)間為設(shè)定時(shí)間,實(shí)現(xiàn)離心的充分和可重復(fù)。
◎ 可選擇氣密性配件,減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
如需更詳細(xì)的產(chǎn)品型號(hào)和參數(shù),請(qǐng)聯(lián)系我司客服,專(zhuān)業(yè)選型。